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    猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒使用相關問題解析

    發布時間: 2021-12-15  點擊次數: 443次
      猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。將樣品、標準品和HRP標記的檢測抗體依次加入被捕獲抗體包被的包被微孔中,孵育并徹底洗滌。與底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下變成藍色,在酸的作用下變成最終的黃色。顏色深度與樣本中的顏色深度呈正相關。用酶標儀在450nm波長處測定吸光度(OD值)并計算樣品濃度。

     

    猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

     

      猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒樣品處理和要求:
      1、血清:全血標本室溫放置2小時或4℃過夜,1000g離心20分鐘,取上清液檢測,或標本保存于-20℃或-80℃℃,但應避免反復凍融。
      2.血漿:EDTA或肝素可用作抗凝劑。樣品采集后30分鐘內,2-8℃1000g離心20分鐘,或保存于-20℃或-80℃,但應避免反復凍融。
      3、細胞培養上清液或其他生物樣品:1000g離心20分鐘,取上清液檢測,或保存在-20℃或-80℃,但避免反復凍融。
      注意:樣品溶血會影響后期檢測結果,因此溶血樣品不應進行檢測。
      猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒使用相關問題解析:
      1、試劑選擇:試劑在檢測前應提前半小時在室溫下解凍。
      2、加樣過程中可能出現的問題:當使用血清或血漿作為檢測試劑時,血清和血漿難以分離。這時候的解決辦法是在室溫下放置1~2小時,然后離心。
      3、洗盤容易出錯:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。
      4、顯色問題:使用過期的顯影劑或顯影劑使用后放置時間過長,可能導致顯影劑不顯色。因此,在進行顯色反應時,首先要檢查顯影液本身的狀況。
      5、終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒。
      6、讀板:讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈。
     
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